产品简介:
上海华潍生产的磷酸钙法细胞转染试剂盒(Calcium Phosphate Cell Transfection
Kit),在传统的磷酸钙细胞转染方法的基础上进行了改良,提高了转染效率,并降低了毒性。用磷酸钙法转染细胞,不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定株。
HEK293或HEK293T细胞,即通常所谓的293细胞,是最适合磷酸钙法转染的细胞之一,优化条件后转染效率可以高达90%以上;通常很容易达到40-50%左右的转染效率。大多数常见的细胞例如Hela细胞、CHO细胞等也都适合磷酸钙法转染,但效率比293细胞要略低一些。
本试剂盒不仅适合于大多数贴壁细胞的转染,也适用于一些悬浮细胞的转染。
本试剂盒提供的试剂都经无菌处理,可以直接使用。
关于不同的细胞转染试剂的主要特点和差异方面的比较,以及如何选择适当的细胞转染试剂,可参考上海华潍的相关网页:http://www.huaweipharma.cn
本试剂盒足够转染不少于200个细胞样品。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
转染时,把DNA-氯化钙溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA-氯化钙溶液中。
高纯度的质粒是获得高转染效率的必要条件,要确保A260/A280大于1.8,并且电泳检测抽提到的质粒90%以上都是超螺旋。
在用磷酸钙法转染细胞时应使用浓度不高于5%的二氧化碳,二氧化碳的最佳浓度为3%左右。
BBS溶液的pH值直接关系到转染效率,尽量避免把BBS溶液长时间暴露在空气中,以免被空气中的二氧化碳酸化。
转染时由于质粒不同、细胞不同,最佳的质粒用量需自行摸索。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。